色谱柱的柱效能是评价色谱性能的一项重要指标，混合物能否在色谱柱中得到分离，除取决于选择合适的固定相外，还与色谱操作条件及色谱柱的装填状况等因素有关。
不过在HPLC中，柱效一般出厂后就基本固答定，随着使用过程的损耗而柱效降低。人工填柱的色谱柱，因为每次装柱时所用的溶液、填料量都不尽相同，因此柱效也会有变化。测柱效主要是看柱是否具有良好的分离效果。
一、评价柱效
仪器：高效液相色谱仪(带自动进样器，或配置微量进样器)、分析天平。
试剂：苯、萘、联苯(均为分析纯)、甲醇(色谱纯)、纯净水。
色谱条件：色谱柱：C18，4.6×150mm，5μm;流动相：甲醇-水(80：20，v/v);
检测波长：254nm;流速：1mL·min-1;柱温：30℃;进样量：10μL。
操作步骤：
（1）分别精密配制含苯、萘、联苯浓度均为约1mg·mL-1的3份对照品溶液各10mL。
（2）分别精密吸取上述对照品溶液各2mL置于10mL容量瓶中，加流动相稀释，并定容至刻度，摇匀，得到含苯、萘、联苯的混合对照品溶液。
（3）按照上述色谱条件操作，进样，记录色谱图。
（4）计算各色谱峰的理论塔板数及各峰间分离度。
实验数据处理：
二、提高液相色谱柱效（HPLC）
1、提高液相色谱柱柱效的方法
要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。
(1)降低移动相的流速,但会使分析时间延长。
(2)减少固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。
(3)减小固定相的颗粒度,但不能过分,过分后色谱柱的渗透率也会减小。
(4)选用低粘度的移动相,以利于快速传质,但却不利于多组份分析。
(5)适当提高柱温,可降低移动相的粘度,但柱效和分离度也随之降低。
(6)尽量减小停滞移动相的体积,但却加快了移动相的流速。
从以上介绍可看出,在色谱分析过程中,各种因素是互相联系和制约的。只有通过对柱效值的跟踪测算,对自己分析方法不断的研究和实践,才能找到最佳的工作条件。
2、对柱效值进行跟踪测算应注意的问题
我们也应记住柱效值并不足以预测在所有条件下的柱性能，对大多数色谱工作者来说,柱性能指的是色谱柱用于特定分离的能力,而仅仅有高柱效并不能保证这种分离能力。
不管用什么特定的测试方法,都会有几个参数影响柱效的测定。这些参数包括:洗脱液的成分和粘度及其线流速,测定塔板数所用的溶质,温度,柱长,填料装填方式,颗粒度,还有所选用的测量和计算方法。而测量和计算方法对柱效值的确定起着极大的作用。
三、提高气相色谱柱柱效（GC)
在实际工作中，我们通过对载气流速、进样技术、气化室温度、色谱柱、柱温、检测器温度这六个方面的选择，有效地提高了柱效率，使分析出的色谱峰峰形正常，无峰形扩张、拖尾、峰漏检等不良现象出现，分离度高，从而提高了分析结果的准确性。
所谓柱效就是在较短的时间内，用较短的柱子达到满意的分析结果。为了提高色谱柱的柱效率，减少色谱峰扩张、拖尾及峰漏检等现象.
（1）载气流速的选择
气相色谱最常用的载气是：氢气、氮气、氩气、氦气。经过长时间的实验，发现对于一般色谱仪而言，载气流量为20-100ml/min
目前我们分析液化气用的是热导检测器，载气用的是氢气，其流量控制是30 ml/min。分析戊烷发泡剂用的是氢火焰离子化检测器，载气用的是氮气、燃烧气氢气和氧气，这三种气体的体积比是氮气：氢气：氧气为1：1：10，分析效果都是较好的。
（2）进样技术的选择
在气相色谱分析中，一般采用注射器或六通阀门进样。在考虑进样技术的时候，以注射器进样为主来研究。
进样量：进样量应控制在瞬间气化，达到规定分离要求和线性响应的允许范围内。填充柱冲洗法的瞬间进样量:液体样品或固体样品溶液一般为0.01～10μl,气体样品一般为0.11～10ml,在定量分析中,应注意进样量读数准确。
注射器里空气的排除：用微量注射器抽取液体样品,只要重复地把液体抽入注射器又迅速把其排回样品瓶,就可以将空气排除。或着用计划注射量的约2倍的样品置换注射器3～5次,每次取到样品后,垂直拿起注射器,针尖朝上，留在注射器里的空气都应当跑到针管顶部，推进注射器塞子,空气就会全部被排掉。
保证进样量的准确：用经置换过的注射器取约计划进样量2倍左右的样品,垂直拿起注射器,针尖朝上,让针穿过一层纱布,这样可用纱布吸收从针尖排出的液体。
进样手法：双手拿注射器。用一只手(通常是左手)扶针插入垫片,注射大体积样品(即气体样品)或柱前压力极高时,要防止从气相色谱仪注样器来的压力把注射器活塞弹出(即用右手的大拇指按压住活塞顶部)。让针尖穿过垫片尽可能深的进入进样口,压下注射器活塞停留1秒钟,然后尽可能快而稳地抽出针尖(抽出的同时继续压住注射器活塞)。
进样时间：进样时间长短对柱效率影响很大。若进样时间过长,遇使色谱区域加宽而降低柱效率。因此,对于冲洗法色谱而言,进样时间越短越好,一般必须小于1秒钟。
（3）气化室温度的选择
为选择合适的气化室温度，在多次的进样中我们发现，气化室温度比柱温高50-100℃或比样品组分中最高沸点高50-70℃较为合适。温度过高过低都会影响柱效。
- 网友经验：提供柱效的有效途径
一般柱效不好，先排除其他问题，都没有问题的话就是柱子不行了。
如果柱子比较老，可以反过来小流速冲洗一下，我做过效果很好!(仅适用旧柱子啊，有点风险)。
把柱头变色的填料挖掉，用同类新的填料填充好，效果很好。
正向冲洗色谱柱、反向冲洗色谱柱、超声清洗色谱柱筛板、如果是柱内死体积增加则需更换新柱。
如果柱子真的很老旧了，就反相冲洗试试，可能还能用一段时间，但不会太久。在然后就只能换填料了，或换新的柱子。
我们前段时间也是柱效不好，其他都比较正常。后来把柱子重新活化了一下，柱效由原来的两千升到四千多了。不过维持了一个月又不行了。
提高色谱柱柱效，请记住一个口诀：
第一柱子温度能调高，第二可选柱子内径小。
第三柱外体积小更妙，第四使用超纯的硅胶。
第五氘灯要选能量高，第六采用中空透光灯。
第七改变有机相比率，第八流动相pH可鼓捣。
第九可把键合相选挑，第十改变有机添加剂。
十一改变流动相配比，十二缩短检测响应时间。
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